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液相色譜柱關(guān)于尺寸的選擇說明

更新時(shí)間:2018-07-09      點(diǎn)擊次數(shù):5347
  
  
  現(xiàn)代液相色譜分析中,色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞,選擇合適的色譜柱可以縮短方法開發(fā)所需的時(shí)間,并且使方法更具穩(wěn)定性。但是現(xiàn)在市場上色譜柱種類繁多,不同類型的色譜柱分離對(duì)象不同,因此,要做合適的選擇,必須對(duì)此有一定的認(rèn)識(shí)和了解。
  
  液相色譜柱根據(jù)功能分為HPLC和UHPLC、UPLC柱,根據(jù)內(nèi)徑大小又有常規(guī)分析柱,窄徑柱和毛細(xì)管柱的類型區(qū)別,其中應(yīng)用廣泛的液質(zhì)聯(lián)用儀就是用的窄徑柱。因?yàn)榉治鲱惖膬x器主要致力于對(duì)樣品成分的判斷,就需要能夠準(zhǔn)確分離少量樣品的內(nèi)徑較小的色譜柱。而內(nèi)徑孔大的色譜柱用于進(jìn)樣量大的成品純化和分離。
  
  液相色譜柱尺寸選擇:
  
  較長的液相色譜柱組分保留較強(qiáng),運(yùn)行時(shí)間較長,柱效更高,分離度效果更好。在實(shí)際工作中應(yīng)綜合衡量運(yùn)行時(shí)間和柱效,選擇長度適宜的色譜柱。例如含量測定、溶出檢測對(duì)于分離的要求較低,可選用較短的液相色譜柱,減少運(yùn)行時(shí)間;有關(guān)物質(zhì)一般選擇較長的色譜柱,提高分離效果。
  
  內(nèi)徑小的色譜柱靈敏度較高,峰型更窄,但是載樣量較小。如果載樣量滿足要求,需要更高更尖銳的峰提高靈敏度,可以選擇更小內(nèi)徑。但是如果進(jìn)樣量超過了柱載樣量,色譜峰將極大變寬。所以應(yīng)在靈敏度和載樣量之間綜合衡量。
  
  粒徑小的色譜柱分離度較好,色譜柱壓力更大。如果5μm粒徑的色譜柱分離度稍有不足,則同型號(hào)3μm色譜柱的分離度一般會(huì)提供令人滿意的選擇性。
  
  如果選擇較小尺寸的液相色譜柱,應(yīng)衡量柱外死體積對(duì)柱效的影響,柱外死體積包括連接管線、進(jìn)樣體積、色譜柱接頭與色譜柱連接處的空隙等。所以一般超液相使用的色譜柱不適用于常規(guī)液相儀。小規(guī)格色譜柱使用同一品牌的儀器,減少連接處空隙引入的死體積。
  
  
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