液相色譜柱是一種用于液體色譜分析儀器。與正相硅膠柱配合使用的流動相,通常包含己烷和庚烷等烴類溶劑,并混合有相對較少的強極性溶劑。非極性化合物將先從柱上洗脫,而極性溶質(zhì)與硅膠表面上的硅烷醇基團具有較強的相互作用。硅膠的極性選擇性對于毒枝菌素的分離非常有用。由于硅膠的低運行成本以及相對于反相柱反壓較低,通常用于制備色譜中。硅膠是有機化學家常用的低壓制備工具。
A:物理因素
1.硅膠純度——填料硅膠的純度與殘留金屬離子濃度。
2.色譜柱尺寸——填料床的長度和內(nèi)徑。
3.顆粒形狀——球型或不規(guī)則型。
4.粒徑——平均顆粒直徑,通常3-10μm。
5.表面積——顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和,以m2/gram表示。
6.孔徑——顆粒的孔或腔的平均尺寸,范圍80-300Å。
B:化學性質(zhì)
1.鍵合類型——單體鍵合 - 鍵合相分子與基體單點相連。
2.碳覆蓋率——與基體物質(zhì)相連的鍵合相的量。
3.封端——鍵合步驟之后,用短鏈將裸露的硅羥基鍵合后封閉起來。
孔徑和比表面積是相輔相成的兩個概念。孔徑小比表面積大,反之亦然。比表面積大,增加樣品與鍵合相之間的反應,增加保存,上樣量和復雜成分的分離度;比表面積小,平衡時間快,適合梯度分析。